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分光光度計(jì)的原理介紹
瀏覽次數(shù):1603發(fā)布日期:2021/4/7
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分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(zhǎng)的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。

 

光譜范圍

包括波長(zhǎng)范圍為400~760 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~400 nm的紫外光區(qū).不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

 

鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(zhǎng)的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍(lán)靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。

 

氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(zhǎng)的光譜可作為紫外光光度計(jì)的光源。

 

物質(zhì)的吸收光譜

 

如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,即光源發(fā)射光譜中某些波長(zhǎng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。

 

不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。

 

物質(zhì)的吸收光譜

 

當(dāng)光線通過某種物質(zhì)的溶液時(shí)透過的光的強(qiáng)度減弱.因?yàn)橛蟹止庠谌芤旱谋砻娣瓷浠蚍稚?/font>,分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收只有分光可透過溶液。

 

入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過光。

 

如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素成的入射光的損失則:

 

入射光 = 吸收光 十 透過光

 

原理

分光光度計(jì)采用個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線透過測(cè)試的樣品后,分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

 

單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,其關(guān)系如下式:

 

A=-lg(I/I)=-lgT=kLc

 

式中 :A 為吸光度;

 

I。為入射的單色光強(qiáng)度;

 

I 為透射的單色光強(qiáng)度;

 

T 為物質(zhì)的透射率;

 

k 為摩爾吸收系數(shù);

 

L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長(zhǎng);

 

c 為物質(zhì)的濃度;

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